Was ist der Unterschied zwischen einem biologischen und einem technischen Replikat?


Antwort 1:

Das beste Beispiel ist qPCR. Ich möchte beweisen, dass mein Lieblingsgen (MFG) mit dem Alter hochreguliert ist. Ich brauche also biologische Replikate, um die biologische Variation zu kontrollieren. Obwohl ich alle Tiere im gleichen Alter nehme, variieren sie offensichtlich, aber im Durchschnitt sehe ich den Ausdrucksgrad. Abhängig von der Variation benötigen Sie möglicherweise viele Tiere, aber sagen wir, 3 ist ausreichend. Wenn ich den qPCR einrichte, werde ich jede Reaktion dreifach durchführen. Dies sind technische Replikate, um die Unterschiede in meiner Fähigkeit zu berücksichtigen, alles genau gleich zu pipettieren und einzurichten. Also drei Tiere für die biologische Variation, insgesamt 6 bei Jung und Alt und ein Gen in dreifacher Ausfertigung für insgesamt 18 Reaktionen. In Wirklichkeit würden Sie auch ein oder mehrere Kontrollgene (Actin, Gapdh usw.) auch dreifach ausführen.

In der Biologie ist es am besten, sie als Kontrollen zu betrachten, die sich nicht replizieren. Sie müssen Abweichungen berücksichtigen, indem Sie die richtigen Steuerelemente in den richtigen Zahlen ausführen. Ein Großteil dieser Variation ist natürlich; aufgrund von Fliegen / Mäusen / Würmern / Zellen, die nicht identisch sind. Viel wird auch von Ihnen, dem Wissenschaftler oder den Maschinen, die Sie verwenden, vorgestellt. Es ist in Ordnung, sich eines als biologisch und eines als technisch vorzustellen, aber Sie sind besser dran, wenn Sie einfach versuchen, so viele Variationen wie möglich in Ihren Experimenten zu kontrollieren, unabhängig von der Quelle.


Antwort 2:

Eine sehr gute Definition, die ich kürzlich gehört habe, wäre:

Ein technisches Replikat ist ein Experiment, das einmal durchgeführt und mehrmals gemessen wurde.

Ein biologisches Replikat ist ein Experiment, das mehrmals durchgeführt (und somit auch gemessen) wird.

Beachten Sie, dass ein Experiment eine tatsächliche Störung des biologischen Systems ist, das Sie sind. Wenn Sie also mehrere Western Blots mit demselben Lysat durchführen, handelt es sich um ein technisches Replikat.